Mecanismo epigenòmico tratado en relacion a la Apendicitis

 Tema: MICROBIOTA, EPIGENETICS AND DRUG RESPONSE IN COLON CANCER

Mecanismo epigenòmico tratado: miARN,inhibidores metilación del ADN y la modificación de histonas

Còmo se lo hizo;

La composición de la microbiota, modifica resultan en expresión alterada de genes que afectan la respuesta inmune e inflamatoria en las células huésped por medio del receptor tipo Toll 4,mediantes los  de inhibidores químicos de la metilación del ADN (DNMT) se reactivar genes supresores de tumores silenciados, junto con el uso de inhibidores de histona deacetilasa : como tricostatina A y trapoxina, seguido del uso de vorinostat (ácido hidroxámico suberoilanilida) se busca  parar los efectos  inflamatorios en las células huésped con riesgos  de neoplasias, como el cáncer gástrico o colorectal, así como para trastornos no tumorales, como la enfermedad inflamatoria intestinal  (apendicitis) o la enfermedad celíaca 

Bibliografia:

file:///C:/Users/Pc/Downloads/44191-Texto%20del%20art%C3%ADculo-166046-1-10-20201012.pdf

.Técnicas de Edición de Acidos Nucléicos

 Tema:Potentes inhibidores de CRISPR-Cas9 de genomas de Staphylococcus

Tip de edicion: In vivo-Celulas eucariotas

Dirigido hacia: ADN guiado por ARN de las enzimas CRISPR-Cas

Dirigido por: anti-CRISPR (Acrs)

 Organo a tratar : Apendice

 Via de administracion  Parenteral

 Resultados

  Corto::inhibir Staphylococcus aureus Cas9 (SauCas9)

https://academic.oup.com/bjsopen/article/5/1/zraa045/6073400?login=true   

Apendicitis aguda en pacientes con leucemia sometidos a trasplante de células madre hematopoyéticas durante la fase neutropénica: serie de casos de un solo centro de TMO en China

 La apendicitis es una complicación rara pero potencialmente mortal en pacientes sometidos a trasplante de TCMH

Tipo de stem cell: células madre hematopoyéticas (TCMH).

Método de obtención: Extracción  de sangre periférica 

Vía de administración: Inyección vía intravenosa

Resultados :En  cultivos a largo plazo expande el pool de células madre transplantables

y  la apendicitis aguda que ocurre durante la fase neutropénica del TCMH 

Bibliografia: https://www.nature.com/articles/bmt2017209

Modelos animales para estudiar la inflamación intestinal aguda y crónica en mamíferos

 Modelos animales para estudiar la inflamación intestinal aguda y crónica en mamíferos

Tipo de animal transgenico:

ratones c57bl/6, los ratones knockout para IL-10 

Metodo por el que fue obtenido:

xenoinjertos

Microinyeccion  pronuclear, celulas madre embrionicas

Uso que se ha dado:

Estudiar los modelos de enfermedad inflamatorias agudas intestinales para el desarrollo de estrategias de prevención y tratamiento eficaces, En este raton tiene el desarrollo de leve a moderada inflamación en el segmento intestinal excluido y reproducir las lesiones característica distintiva en el ser humano

Ventajas :

 De fácil cuidado y mantenimiento, por su pequeño tamaño.

› Bajos costo de manutención.

› Cepa definida.

› Diversidad de características específicas que sirven como modelo.

› Eficiencia reproductiva.

› Por su vida relativamente corta es excelente para su uso en ensayos crónicos de

toxicología, microbiología, virología, farmacología, oncológicas, etc.

› Corto tiempo de generación

Desventajas:

- El Método radica en que la integración del ADN se produce en diferentes etapas del embrión en desarrollo, lo que implica que el ADN no se integra en todas las células somáticas o en la línea germinal y por lo tanto no hay transmisión del transgen a la descendencia. 

-No toda inserción exitosa del ADN artificial en un gen produce la pérdida de una función

-Aunque sean modelos parecidos al ser humano aveces los tratamientos eficaces en ratones no sera lo mismo en seres humanos.

-Desactivar un gen puede producir distintas características de aquellas observadas en los seres humanos

-  La falta de ratones adultos limita los estudios al desarrollo embrionario.

Bibliografía: https://gutpathogens.biomedcentral.com/articles/10.1186/s13099-015-0076-y

https://dspace.itcolima.edu.mx/jspui/bitstream/123456789/809/1/EVELYN%20SARAHI%20MONTES%20GARC%C3%8DA.pdf

ADN Recombinante

ADN Recombinante natural en bacterias

Se dio un enfoque transcriptómico de RNA-seq con validación de los resultados de expresión génica por qPCR. Se reveló 40 genes que son homólogos entre  cepas de B. fragilis  divergentes. Los efectos bactericidas relacionados con el metronidazol, se encuentra la generación de roturas de ADN monocatenario (ss) y bicatenario (ds). Se ha demostrado que la cepa de B. fragilis que sobreexpresa la proteína RecA exhibió una mayor resistencia a este fármaco, siendo la RecA una proteína de reparación del ADN principal que realiza la reparación por recombinación homóloga y controla la respuesta SOS.

Bibliografía: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2016.01465/full#S5  

ADN Recombinante artificial 

T:Anticuerpos monoclonales específicos para enterotoxinas de Bacteroides fragilis BFT1 y BFT2 

O: Obtener monoclonales

G: bft.gen (profragilisina-1,profragilisina-2) 

ER:tripsina

EL: E-cadherina

V: pET28a 

CR: E . coli 

MTG: Conjugacion bacteriana

MIC:ForteBio Octet RED96,ELISA sándwich,PCR

Bibliografía:

https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0173128  

La variante de secuencia en 4q25 cerca de PITX2 se asocia con apendicitis

 

 (Asociación de rs2129979 y variantes circundantes en 4q25 con apendicitis (N = 8.566). La variante principal se muestra como un círculo púrpura)

Para descubrir variantes de secuencia asociadas con el riesgo de apendicitis, se realizó un estudio de secuenciación  de genoma completo (GWAS) de apendicitis. Se detectó una sola señal representada por una variante intergénica rs2129979 [G] cercana al gen PITX2 que se asocia con un mayor riesgo de apendicitis (OR = 1,15, P = 1,8 × 10-11 ). Solo en pacientes diagnosticados en la edad adulta.  Hay una asociación entre una variante de secuencia común y el riesgo de apendicitis en PITX2  el cual se lo ha relacionado con una mayor prevalencia de complicaciones gastrointestinales e intraabdominales. Población estudiada: Islandia y los Países Bajos.

Bibliografía : 

Kristjansson RP, Benonisdottir S, Oddsson A, Galesloot TE, Thorleifsson G, Aben KK, et al. La variante de secuencia en 4q25 cerca de PITX2 se asocia con apendicitis. Sci Rep.2017; 7 (1): 3119. Disponible en :

https://www.nature.com/articles/s41598-017-03353-0

Utilidad de La polimerasa en tiempo real para determinar los niveles de CCL2 y CCR2 en el modelo de apendicitis.

La reacción cuantitativa en cadena de la polimerasa en tiempo real y la transferencia Western se utilizaron para determinar los niveles de CCL2 y CCR2 en el modelo de apendicitis. Se usaron anticuerpos CCL2 para silenciar la actividad endógena de CCL2 in vivo.  En conclusión CCL2 y su principal receptor CCR2 estaban regulados positivamente en pacientes con apendicitis, particularmente aquellos con apendicitis compleja (apendicitis gangrenosa y perforada). Además, el silenciamiento de CCL2 alivió la lesión inducida por apendicitis en conejos. 

 

Bibliografía:

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32865442/