Tema:Potentes inhibidores de CRISPR-Cas9 de genomas de Staphylococcus
Tip de edicion: In vivo-Celulas eucariotas
Dirigido hacia: ADN guiado por ARN de las enzimas CRISPR-Cas
Dirigido por: anti-CRISPR (Acrs)
Organo a tratar : Apendice
Via de administracion Parenteral
Resultados
Corto::inhibir Staphylococcus aureus Cas9 (SauCas9)
La apendicitis es una complicación rara pero potencialmente mortal en pacientes sometidos a trasplante de TCMH
Tipo de stem cell: células madre hematopoyéticas (TCMH).
Método de obtención: Extracción de sangre periférica
Vía de administración: Inyección vía intravenosa
Resultados :En cultivos a largo plazo expande el pool de células madre transplantables
y la apendicitis aguda que ocurre durante la fase neutropénica del TCMH
Bibliografia: https://www.nature.com/articles/bmt2017209
Modelos animales para estudiar la inflamación intestinal aguda y crónica en mamíferos
Tipo de animal transgenico:
ratones c57bl/6, los ratones knockout para IL-10
Metodo por el que fue obtenido:
xenoinjertos
Microinyeccion pronuclear, celulas madre embrionicas
Uso que se ha dado:
Estudiar los modelos de enfermedad inflamatorias agudas intestinales para el desarrollo de estrategias de prevención y tratamiento eficaces, En este raton tiene el desarrollo de leve a moderada inflamación en el segmento intestinal excluido y reproducir las lesiones característica distintiva en el ser humano
Ventajas :
De fácil cuidado y mantenimiento, por su pequeño tamaño.
› Bajos costo de manutención.
› Cepa definida.
› Diversidad de características específicas que sirven como modelo.
› Eficiencia reproductiva.
› Por su vida relativamente corta es excelente para su uso en ensayos crónicos de
toxicología, microbiología, virología, farmacología, oncológicas, etc.
› Corto tiempo de generación
Desventajas:
- El Método radica en que la integración del ADN se produce en diferentes etapas del embrión en desarrollo, lo que implica que el ADN no se integra en todas las células somáticas o en la línea germinal y por lo tanto no hay transmisión del transgen a la descendencia.
-No toda inserción exitosa del ADN artificial en un gen produce la pérdida de una función
-Aunque sean modelos parecidos al ser humano aveces los tratamientos eficaces en ratones no sera lo mismo en seres humanos.
-Desactivar un gen puede producir distintas características de aquellas observadas en los seres humanos
- La falta de ratones adultos limita los estudios al desarrollo embrionario.
Bibliografía: https://gutpathogens.biomedcentral.com/articles/10.1186/s13099-015-0076-y
ADN Recombinante natural en bacterias
Se dio un enfoque transcriptómico de RNA-seq con validación de los resultados de expresión génica por qPCR. Se reveló 40 genes que son homólogos entre cepas de B. fragilis divergentes. Los efectos bactericidas relacionados con el metronidazol, se encuentra la generación de roturas de ADN monocatenario (ss) y bicatenario (ds). Se ha demostrado que la cepa de B. fragilis que sobreexpresa la proteína RecA exhibió una mayor resistencia a este fármaco, siendo la RecA una proteína de reparación del ADN principal que realiza la reparación por recombinación homóloga y controla la respuesta SOS.
Bibliografía: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2016.01465/full#S5
ADN Recombinante artificial
T:Anticuerpos monoclonales específicos para enterotoxinas de Bacteroides fragilis BFT1 y BFT2
O: Obtener monoclonales
G: bft.gen (profragilisina-1,profragilisina-2)
ER:tripsina
EL: E-cadherina
V: pET28a
CR: E . coli
MTG: Conjugacion bacteriana
MIC:ForteBio Octet RED96,ELISA sándwich,PCR
Bibliografía:
https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0173128
